尊龙凯时的本试剂盒仅限于科学研究用途,禁止用于医学诊断。本文将详细介绍人白三烯D4 (LTD4) ELISA试剂盒的使用说明及相关检测原理。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测。在预先包被的adropin(AD)抗体微孔中,依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体,经过温育和彻底清洗后,使用底物TMB进行显色。TMB在过氧化物酶的催化下会转变为蓝色,在酸性条件下再转化为黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度成正相关,最终通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以计算样本的浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免任何细胞刺激,收集血液后,以3000转/分钟离心10分钟,迅速小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝,离心3000转30分钟并取上清。
3. 细胞上清液:通过3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水并捣碎,离心3000转10分钟取上清。
5. 保存:若样本未及时检测,请按一次用量分装并置于-20℃冷冻,避免反复冻融。解冻时,请在室温下确保样品均匀充分解冻。
操作注意事项
试剂盒的标准品(S0-S5)浓度分别为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释方法为:将蒸馏水以1:20的比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水中。
洗板方法
按照标准步骤进行洗板,以确保重复性和准确性。
结果判断
在Excel中绘制标准曲线:以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制线性回归曲线,然后根据曲线方程计算样本浓度。
本试剂盒性能强大,是尊龙凯时品牌的重要组成部分,在生物医学研究中具备可靠性和准确性。